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用组织培养法繁殖葡萄

  用组织培养法繁殖葡萄,可达到良葡萄快速育苗的目的,以满足生产需要。同时也是工厂化育苗和脱毒苗木快速繁殖的重要手段,并能常年进行,缩短了苗木繁殖周期,加快新品种的推广应用。

  一、试管苗的初代培养

  葡萄组织培养初代培养,其繁殖材料多取自大田,常带有大量细菌和霉菌,必须进行消毒方可获得无菌材料。材料采集在前三天无雨的晴天上午进行,取带腋芽的葡萄半木质嫩茎,剪取后立即拿入室内,先用自来水反复冲洗,除去病虫枝、残伤枝,减除大叶片,装入广口瓶进行消毒。用无菌操作技术,倒入无菌水浸泡和冲洗,倒去无菌水,加入0.1%升汞(内加2%的95%酒精)浸没材料,并剧烈摇动6分钟~9分钟,剪去受伤端面,剪成单芽茎段,接入培养基中。每瓶插一段,正插入内。标号后放到培养室培养,一周后检查,如未污染,基本上不会再污染。通过对美人指、早红提等品种的生产,取得了90%以上无污染成苗率。

  二、试管苗的继代繁殖

  对初代培养合格或引进的试管苗,一般采用MS、B5、GS等培养基,具体做法如下:

  1.穿好工作服,戴上工作帽,用洁净的水洗手,再用75%的酒精棉球擦手消毒。

  2.取无菌原种苗瓶放于超净台,用75%酒精棉球仔细擦试包头纸及苗瓶外体,并解开包头纸捆扎线绳。

  3.将弯剪刀、枪状镊子浸入75%酒精中,用时取出在火焰上烧15秒~30秒,凉冷备用。

  4.将无菌原种苗瓶的包头纸连同棉塞一同拔下,放在超净台一旁,瓶口在火焰上烧5秒~10秒,用冷却的剪刀将瓶内小苗剪成单芽茎段,下端稍长,上端较短,但剪口距芽至少0.5厘米以上。母株基部要留一芽,使其再发。剪下的单芽茎段,用无菌镊子逐个夹出,放入新的培养基瓶内,并使叶子和芽露出培养基上方。150毫升三角瓶插5个左右茎段,插完后将瓶口在火焰上转动烧一遍,旋好棉塞和包上包头纸,用绳扎好,注明名称和时间等。如此反复的接好所有苗子,并放到培养室。一般每月转接增殖3次。

  三、试管苗的培养

  将接种后的培养苗瓶,放在培养室的培养架上,培养室昼夜温度保持在22℃~28℃,新转接的苗瓶应放在培养架上层,上层温度略高易于生根。培养室的湿度以70%为宜,光照2000~3000勒克斯的日光灯。

  四、移栽

  时期多在冬季或春季进行。

  1.光培炼苗。培养室培养的试管苗生长达瓶口,有3枚~4枚正常叶片时,根系生长良好,连同培养瓶转入温室或大棚内,逐步去掉瓶塞,放在干净的温室中,在2万~4万勒克斯的自然光下炼苗5天~7天,当瓶口长出油亮的叶片,幼茎变淡红色时即可出瓶。

  2.沙培炼苗。最好备有下铺电热线并能调节温度的沙床,使床温维持在25℃左右。以0.6厘米间距布置电热线,其上铺垫2厘米的土,压平,再铺8厘米~10厘米的干净细河沙,湿度以12%左右,即手捏成团落地能散。

  清晨或傍晚,将培养瓶内的幼苗轻轻倒出,洗掉根上附着的培养基,栽入沙床,3厘米~4厘米株距,8厘米~10厘米行距,每平方米大约栽400苗~500苗。栽入沙床后,盖好小拱棚,最初3天,棚内温度保持在25℃左右,最高不超过30℃,最低不低于20℃。相对湿度保持在80%~95%;光照0.7万~1万勒克斯。6天~7天后,拆除临时小拱棚。

  3.温室营养袋炼苗。经沙培后的合格苗,小心挖出,在空气湿度不低于70%,温度20℃~25℃,无直射光下,栽入肥土:沙:腐熟有机肥为1:1:0.2的营养钵中,最初几天对温、光、湿的管理同沙培苗相同。

  4.大田苗圃移栽。选土质疏松肥沃,排灌水方便,距温室较近且日照良好的地块作苗圃,将营养袋苗移栽即可。小苗有3个月的生长期,并及时打掉副梢,促进枝芽老化成熟,达到合格苗。
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