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影响组织培养的因素有哪些

  1.植物的材料

  (1)不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。例如,菸草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。

  (2)同一种植物材料,因器官来源及其生理状况、材料的年龄、储存时间的长短等也会影响实验结果。

  2.培养基

  离体的植物组织和细胞,对营养、环境条件要求相对特殊,需要配制适宜的培养基。植物组织培养常用MS培养基,其主要成分包括:

  (1)无机营养:

  大量元素:除了C、H、O外还有N、S、P、Mg、K、Ca等

  微量元素:Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Co、I等

  (2)有机营养

  维生素、Aa、琼脂、活性炭、烟酸、肌醇、蔗糖等

  (3)植物激素

  植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。按照不同的顺序使用这两种激素,会得到不同的实验结果。

  当同时使用这两种激素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。

  (4)能量和渗透压

  通常植物本身进行光合作用,产生糖类,不需要从外部供给糖,但在植物组织培养进行异养的状况下,大多不能进行光合作用来合成糖类,因此必须哎培养基中新增糖(一般是蔗糖),作为碳源和能源物质,同时糖对保持培养基的渗透压也有重要作用。

  (5)PH

  3.温度

  温度是植物组织培养中成功的重要条件。在植物组织培养中大多采用适温度,并保持恒温培养,以加速生长。通常采用25加减2摄氏度的温度,对大多数植物来讲是合适的,但也因种类而异。进行菊花组织培养时是18~22度。

  4.光照

  不同的植物对各种条件的要求往往不同。组织培养中光照也是重要条件,它对生长和分化有很大影响。当然这也和材料的性质、培养基情况以及由于光照而引起的温度上升等方面的因素有关。菊花培养的光照强度为1000~4000lx,每天光照12h。
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