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兰花的组织培养
  组织培养是先进的无性繁殖方法。取用植物器官或组织的一小部分,脱离母体而加以培养,经过诱导和分化,使它再生成独立的新植株。也称为外植体培养。
  
  目前,兰花的各个部位,各个器官,即根、茎、叶、芽、花序、幼胚等都可以作为外植体进行培养。
  
  组织培养要有必要的设备和比较高的技术措施。首先要有培养室、无菌接种室及各种培养用具、用品等。在培养时要先配制培养基,剥取外植体,然后消毒、接种、转移,后试管苗移植等,都需要比较复杂和细致的技术。现将组织培养的方法简介如下。
  
  (一)培养基的配制
  
  培养基是用各种不同成分和剂量的元素,加上各种维生素、激素等制成。兰花种类不同,培养基的成分也有所不同。大多数的培养基是用固体或半固体的,也有用液体培养的,在液体中培养则需特殊的通气方法,如常用的离心机或转动机,不停地将培养基转动。
  
  培养基须包括矿物质、糖、维生素及生长激素。在实际中用得多的是MS培养基,或在此基础上加添少数激素。MS培养基(MurashigeandSkoogbasicmedium)的成分如下:
  
  成分用量(mg)
  
  NH4NO3硝酸铵400
  
  Ca(NO3)2•4H2O硝酸钙144
  
  KNO3硝酸钾80
  
  KH2PO4磷酸二氢钾125
  
  MgSO4•7H2O硫酸镁72
  
  KCL氯化钾65
  
  NaFe—EDTA螫合铁25
  
  H3BO3硼酸16
  
  MnSO4•4H2O硫酸锰65
  
  ZnSO4•7H2O硫酸锌27
  
  KI碘化钾0.75
  
  IAA吲跺乙酸2
  
  Kinetin激动素0.04—0.2
  
  Thiamin维生素B10.1
  
  Nicotinicac id烟酸0.5
  
  Pyr idoxine维生素B60.5
  
  Glycine甘氯酸2
  
  Myo—inositol肌醇100
  
  Casein—hydrolysate水解酪蛋白1000
  
  Sugar蔗糖2%
  
  琼脂(洋菜)l%
  
  蒸馏水1000ml
  
  PH值为5.0-6.0
  
  配制培养基要在实验室内进行,各种用具、玻璃瓶或试管,都要严格消毒杀菌。后配成的培养液注入玻璃瓶或试管内,再进行消毒,冷却后接入兰花外植体。接种工作应在无菌接种室或超净工作台上完成。
  
  (二)接种方法
  
  1采取茎尖
  
  兰属植物的组织培养以茎尖为常用的材料。茎尖是分生组织为活跃的生长点。选择健壮植株,将外层的叶和鞘叶剥去,把整个茎尖切下,浸入2.5%的漂白粉溶液或7%的次氯酸钠溶液中15—20分钟。然后取出用蒸馏水冲洗5—6次,将消毒液冲洗十净。在显微镜或扩大镜下将茎尖的生长点挑出,并即刻接种到玻璃管培养基上。
  
  2.培养原球体
  
  生长点一般经过4-6周的培养,产生出小而圆的原球体。将原球体取出,重新分切,l分为4,再入培养基内培养,经l—2个月又可长出原球体。同样,再行分割;重新培养。在几个月之内,就会获得大量的原球体。
  
  3分化培养
  
  把切割的原球体放在液体培养基中,放在旋转培养床上进行旋转培养。当其小块组织稍为长大后,转接在分化的培养基上,让它分化根和芽。
  
  4.试管苗移植
  
  当原球体组织分化根和芽,逐渐长大之后,就成为幼小植株。经一段培养,生长到一定程度就应该从玻璃瓶或试管中取出,移植到土壤或基质中了。移出试管后,用自来水将根上的培养基轻轻冲洗干净。栽培基质一般用水苔或蛭石。栽植后移入温室内培养。
  
  在组织培养中要经过两个关:个关是分化培养基的生长激素和剂量,能否分化根和芽,完全取决于它。用什么激素和什么剂量,每种兰花都不一样,要经过摸索试验才能掌握。可以设计几种配方,进行对比实验来确定。第二个关是试管苗移出瓶后,往往不适应外界环境而大批死亡。要创造良好条件,在精心管理之下,才能获得良好结果。
 
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