植物细胞培养是在严格无菌的条件下进行的,在设计植物细胞培养实验室时,应按培养程序来设计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。
要做到无菌的条件,实验室既需要一定的设备、器材和用具,又需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
(1)洗涤间
洗涤间通常要根据工作量的大小决定,一般面积控制在30-50平米,在实验室的一侧设置专用洗涤水槽,用来清洗实验中的玻璃器皿。ZY试验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机,准备1-2个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。为配合洗涤工作,还需要配置落水架、干燥箱、样品柜,超声波清洗器等设备,地面铺装设计应考虑防滑耐湿并排水良好。
植物细胞培养室的要求
(2)消毒间
消毒间应配备电炉、试验台、高压灭菌锅、干热消毒柜、排风灭火设备、细菌过滤设备等。高压灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。普通实验室可选用小型的医用手提高压灭菌锅;中型实验室可以选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅;生产型的实验室可以选用大型卧式灭菌锅。
(3)无菌操作间
无菌操作间主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种间。通常要设置缓冲间,以防止污染。缓冲间的设置应该保证开门方向与接种间方向错开,并且不能同时开启,以防止因人员进出带入杂菌,破坏无菌环境。
(4)培养基配置间
培养基配制间设计面积大约60平米左右,需要配置天平、微波炉、电炉、冰箱、器械柜、药品柜、抽气泵、pH计、培养基分装器、各种规格培养瓶、培养皿、量筒、烧瓶、容量瓶、储藏瓶、移液管等。冰箱体积一般180-200L为宜,用于储存彩色胶卷、激素/维生素等贵重药品、培养基母液以及保存植物材料。
(5)缓冲间
缓冲间应设置水槽,更衣柜,紫外灯。人员在进入无菌操作间前需要换穿无菌工作服和防尘拖鞋。无菌操作间内壁应当用瓷砖或塑钢板装修,室内应该布置超净工作台,紫外灯,解剖镜及其它实验需要用到的实验器械。
(6)培养室
为控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室房间Z好不要安装窗户,但应留有通气孔,并安装排气扇,地面可以用水磨石或瓷砖铺装。培养室一般分为两间,一间为日光培养室,一间为暗培养室。培养室外应该设缓冲间或走廊。
培养室配置有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控制器等。日光灯一般40W,固定在培养架的侧面或隔板下面,每层有两支日光灯,距离为20cm,光照强度为2000-3000LUX。
(7)辅助实验室/细胞学鉴定室
其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,避免各种光学仪器受潮和灰尘污染,同时还应配置各种显微镜、照相系统。
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