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植物组织培养实验室设备

  一、植物组织培养实验室的设置
  
  植物组织培养实验室与其他实验室的主要区别是要求无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。植物组织培养实验室的面积大小和装备取决于两个因素:一是实验性质和研究内容,二是能承受的经费能力。然而,一个标准的植物组织培养实验室必须具备下列条件:①清洗和储存玻璃器皿、塑料器皿和其他实验器皿;②培养基的配制、灭菌和储存;③植物材料的无菌操作;④可控温度、光照、湿度等条件,以便对材料进行体外培养;⑤培养物生长发育过程的显微观察。因此,植物组织培养实验室至少需要有三间相连但相互隔开的房间:间用于玻璃器皿的清洗和储存,以及培养基的制备(称为培养基室);第二间用于无菌操作(称为接种室);第三间用于放置培养物(称为培养室)。此外,如果条件许可,应配备能进行组织和细胞生长显微观察的细胞学实验室。

组培室设计方案
  
  (一)培养基室
  
  培养基室的清洗区应备有各种类型的毛刷、大水槽和冷热水源。此外,还应备有塑料桶,用以浸泡需要清洗的实验室器皿;鼓风干燥箱,用以干燥清洗后的器皿;防尘厨,用以储存干净的器皿。条件允许的话,清洗区应单独设一个房间。如果培养基的制备和器皿的清洗在同一个房间内进行,应特别注意不要使清洗干扰培养基的制备,严格防止肥皂水等溅入培养基内。可以在清洗区与培养基制备区之间临时加一块挡板,或把清洗时间和配制培养基时间错开。
  
  配制培养基所需的一般设备包括以下几种。①工作台:工作台的高度应适合于操作人员工作,要求表面平整、耐高温、放置水平。②低温冰箱:用以储存长期保存的药品。③普通冰箱:用以储存各种化学药品、植物材料和短期储存储备液及母液等。④大塑料瓶:用以储存蒸馏水。⑤天平:用于称量。⑥电热磁力搅拌器:用以溶解化学药品。⑦电炉:用于加热溶化琼脂和手提式高压灭菌锅的加热。⑧酸度计或pH试纸。⑨抽气机或真空泵:用以辅助过滤灭菌。⑩恒温水浴:用于融化琼脂。⑩高压灭菌锅:用以进行培养基灭菌。⑩其他用具。

组培室设计方案
  
  (二)接种室
  
  接种室也称为无菌操作室,好能与外界隔离,不能穿行或不受其他干扰。接种室分更衣间、缓冲间及操作间三部分。更衣间供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩之用。缓冲间位于更衣间与操作间之间,目的是为了保证操作间的无菌环境,同时可放置恒温箱及某些小型仪器。操作间则用于无菌操作,其大小要适当,且其顶部不宜过高以保证紫外线的灭菌效果,墙壁光滑无死角以便清洗和消毒。接种室为密闭式,用紫外线灭菌灯进行空气消毒。有些实验室使用电子消毒灭菌器,它在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰击,使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂,能与细菌的胞膜及酶蛋白进行氧化分解反应,因此靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌的目的,使消毒时没有死角。消毒后空间内的残留臭氧只需30~40min即能自行还原成氧气,对空间不留异味、消毒物体表面不留残毒。
  
  接种室的主要仪器设备是超净工作台。超净工作台可直接购买,安装方便,占用空间小且净化效果很好,为植物组织培养工作提供了良好的无菌操作环境。
  
  (三)培养室
  
  培养室的温度必须是可控的,一般是用空调或热风机使温度保持在(25±12)℃。若要求更高或更低的温度,可使用装有荧光灯的培养箱。培养箱可安装在培养室之外任何方便和安全的地方。
  
  植物组织培养要求一定的光照,采用日光灯源,一般光照强度为1000~30001x。但有些实验需要在散射光下进行,有些则要求完全黑暗条件。因此,在设备上对此应有所准备。光源可由自动定时开关控制。暗培养一般是在特制的木橱内进行或加盖黑布。

组培室设计方案
  
  培养室的湿度应控制在相对湿度80%左右,当培养室的相对湿度降低到50%以下时,应采取措施增加湿度,以免培养基变干。如果湿度太高则应除湿,以免培养瓶盖塞发潮,增加污染的机会。
  
  在培养室内应设有若干培养架以放置培养物。培养架大小一般为1200mm×600mm×400mm,层数根据培养室的空间高度而定,每层培养架装上玻璃板。但玻璃板下面的日光灯在工作时易使玻璃发热,使放置其上的培养瓶及培养基的温度增加,影响培养效果。安装刚硬的铁丝网或细钢管,在其上放筛孔塑料盘,以便空气流动和稳定温度,同时也可使顶层的灯光能透射到下层的培养物上。培养架可以木制也可以钢制,每层分别装有日光灯管。灯管和上一层架子之间装有隔热层,以免上层培养物的底部受热。

组培室设计方案
  
  三角瓶、玻璃罐或培养皿都可直接置于培养架上,或先置于大小合适的盘子上。再将盘子置于培养架上。所用的容器若为试管,就需要有试管架。试管架可用铁丝制作,每个试管架能装25个或50个试管。培养容器必须粘上标签或用记号笔标注,注明详细的实验细节(植物名称、外植体、培养基、培养时间等)。
  
  培养室内应设有摇床,以便进行液体悬浮培养。摇床可以是平动式的,也可以是旋转式的。应选购温光可控式摇床。
组培室设备
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