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组培甘薯脱毒与快速繁殖技术
  1.无菌体系的建立
  
  1)外植物的选取、灭菌和接种
  
  选择适宜当地栽培的高产优质或用途特殊的甘薯品种植物作为母株,取枝条,剪去叶片后切成数段。每段带一个腋芽,含顶芽的2-3节。
  
  剪好的茎段流水数分钟后。用滤纸吸干表面水分后70%酒精中浸泡10s,在用0.1%升汞溶液消毒10min,用无菌水冲洗5次;或用10%次氯酸钠溶液消毒15min,用无菌水冲洗3次。
  
  把消毒好的芽放在立体显微镜下,无菌削去丁芽和腋芽上较大的幼叶,切去0.3-0.5mm含1~2个叶原基的茎尖组织,接种在培养基上。
  
  2)培养基及培养条件
  
  甘薯茎尖培养较理想的培养基为MS+IAA0,1一0,2mg/L+6-BA0.1一0.2mg/L+3%蔗糖,pH值为5.8~6,0。若添加GA3().05mg/L,对茎尖的生长和成苗会有更好的促进作用。培养条件以温度25~28℃,光照强度巧00、2000lx,光照14h/d为宜。
  
  2,初代培养
  
  不同品种的茎尖生长情况有差异。一般培养10d茎尖膨大并转绿,培养20d左右茎尖形成2~3mm的小芽点,且在基部逐渐形成绿色愈伤组织。此时应将培养物转人无激素的MS培养基上,以阻止愈伤组织的继续生长,使小芽生长和生根。芽点基部少量的愈伤组织对茎尖生长成苗有促进作用,但愈伤组织的过度生长对成苗则非常不利,且有明显的抑制作用。
  
  3.初级快速繁殖
  
  当薯苗长至3~6cm高时,将小植株切段进行短枝扦插,除顶芽一般带有]、2片展开叶片外,其余的切段都是具一节一叶的短枝·切段直插于三角瓶内无植物生长物质的MS培养基中,培养条件同茎尖培养。2~3d内,切段基部即产生不定根,30d后长成具有6、8片展开叶的试管。
  
  4.脱毒苗快速繁殖
  
  试管苗经严格检测确认为脱毒苗后,可进行试管切段快速繁殖。试管繁殖脱毒苗一般30、40d为一个繁殖周期,一个腋芽可长出5片以上的叶,繁殖系数约为5。为降低人工培养的成本,可用食用白糖代替蔗糖;将培养基中的大量元素减半,甚至用I/4MS(大量元素)培养基;尽可能利用自然光照培养;也可用经检验合格的自来水代替蒸馏水或无离子水。
  
  5@试管苗驯化栽
  
  l)试管苗驯化移栽
  
  取株高达到3~5cm的健壮苗,将瓶塞打开,置室温和自然光照下锻炼2~3d,使幼苗逐渐适应外界环境条件。移栽时倒人一定量的清水,振摇后松动培养基,小心取出幼苗,洗去根部的培养基以防杂菌滋生,再移至灭菌的蛭石或沙性土壤中。待苗生根、长出新叶后再移植于土壤中,有利于苗的快速生长·
  
  2)试管苗驯化移栽管理
  
  基质温度是根系成活的关键,但不宜过湿·应维持良好的通气条件,促使根生长。空气也应保持湿润,以防试管苗失水枯死·移栽初期,可用塑料薄膜覆盖·温度以25~30℃为宜,并注意遮阳,避免日晒·脱毒苗繁育虽在防虫网内进行,但有时会因封闭不严或土内自生性出蚜,而导致网内有蚜虫等现象发生,或者出现地下害虫危害。为此,应定期喷洒农药,防治病虫害。
  
  6.适时定植
  
  蛭石缺乏植物生长必需的营养,故当薯苗成活后,应及时植于防虫网内已消毒的土壤中,促使其生长·为提高网室利用率,定植的薯苗应适当密植·采取剪秧打插、以苗繁苗的方式,可在短期内得到数量巨大的脱毒苗。在北方,为克服冬、春温度过低的影响,可建立防虫温室,并辅以取暖升温措施,保证脱毒全年进行繁育。以此法繁育的薯苗在防虫网内所结薯块即为原原种薯。
 
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