（二）植物组织培养方案设计的基本程序

　　

　　植物离体培养方案的设计一般包括以下工作环节。研究课题的选择是整个试验工作的第一步正确选择课题，试验研究就有了良好的开端。一般来说．试验课题通常来自两个方面：一是由教师申报承担的国家或企业指定的以此为基础提：最终的目，]方向；二是学生自己选定的试验课题。学生自选课题时，首先自选课题时首先应该明确试验的目的、需解决的问题及在科研和生产中的作用、效果等。

　　

　　目标植物的确定是由植物组织培养试验的目的来决定的。如果只是为了训练和培养；如果只是少了训练和培养初学者的植物组织培养技能、植物离体培养过程中生长发育的一般状况而设计的验证性试验，就应该选择那些植物组织培养技术较为成熟的容易获得成功的植物种类作为试验对象，以确保试验教学目的能顺利实现；如果是为了培养或提高学习者的科研能力或是为了满足社会生产发展需要进行新技术开发而设计的探究性试验，就应该选择那些植物组织培养技术尚不成熟或前人还未进行过植物组织培养尝试的新、优、特植物物种或品种作为试验对象，以确保新植物组织培养技术研发成功后能为社会带一定的经济效益和生态效益。

　　

　　2．查询和收集文献

　　

　　培养目标确定后，为了进一步了解目标植物离体培养方面的研究进展，增强感性认识，以便试验设计更具针对性和科学性，就必须收集足够数量的有关该植物的组织培养研究文献作参考。参考文献获得的途径如下：到图书馆借阅植物组织培养技术方面的专著、教材、专业期刊等纸质文献；利用因特网查阅某些专业网站（如中国植物组织培养网等）、数据厍（如中国知网的《中国学术期刊网络出版总库》、《中国博士学位论文全文数据库》，维普资讯网的《中文科技期刊数据库》等）、私人博客中的有关电子文献；到相关科研所、高等院校、植物组织培养工厂等企事业单位参观和咨询访问。

　　

　　当培养对象是国内外首次进行离体培养研究的植物，无文献可查时，可以根据植物分类学知识，收集那些与其亲缘关系较近的品种或物种的梢物组织培养研究文献。

　　

　　3、分析研究文献

　　

　　植物离体培养经常受很多未知因素或变量困扰，一次试验获得的结果有时很难在下一次试验中重复，或者一个实验室取得的研究成果难以在另一个实验室重新实现，且实验搴中研究成功的方法需要加以调整才能在规模化生产中产生类似的结果·因此，在设计植物组织培养试验方案时，对他人研究方案切勿照本宣科，一味模仿·正确的做法如下：在教师或植物组织培养专家的指导下，首先要对巳收集到的所有文献进行认真别、去伪存真，然后对可信度较高的文献进行认真的研读、分析，获取必要的植物组织培养技术信息，以备设计植物组织培养试验时参考．分析研读植物组织培养文献时，首先要注意收集以下几方面的技术信息：．被选择外植体0型、来源部位、生状态，发甯年齡．取材季节、处理方法！包括预理和消毒）、剪取大小、接种方式、污染、褐化、分裂、分化及其成苗途径等内容，离体培养各阶所选用培养基的基本类型、配方改良剂筛选方法，尤其是培养基中添加植物生长调节剂的种类和使用剂量；．外植体培养条件的选择与调控情况；@试管苗驯化条件及移栽基。

　　

　　配制方法。其次对收集到的各种技术信息进行深人分析整理，归纳总结出影响目标植物离体培养各个环节的主要因素。

　　

　　4，方案设计

　　

　　植物离体培养的方案设计一般包括试验设计、试验实施、数据分析和验证试验四个步骤。试验设计是进行植物组织培养方案设计的重要环节，试验设计合理与否不仅直接关系到能否获得所需要的数据资料，而且还直接影响数据资料的质量。学科不同、研究问题的目的和性质不同，试验设计的方法也不同。植物离体培养的试验设计一般采用单因素试验、多因素试验和广谱试验等方法，但以单因素试验和多因素试验最为常见。单因素试验是指在一项试验中只有一个试验因素可设置为若干不同水平，其他的可控因素不变的试验多因素试验则是指在一项试验中有两个或两个以上的试验因素同时设置为若干不同水平的试验。在多因素试验设计时，常用的设计方法有正交试验设计和均匀试验设计两种。正交试验中各个试验因素搭配均匀，以最大限度排除其他因素的影响，突出被考察因素的作用，试验结果能基本体现因子间的交互作用，试验数据处理简单，能比较容易判断各因素对试验对象的影响效应。