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红掌组培快繁技术分析

  红掌是天南星科花烛属多年生附生常绿草本花卉,节间短,株高可达1m,叶片单生,长圆状、心形或卵圆形,深鲜绿色,有光泽。佛焰苞直立张开,蜡质,卵圆形或圆形,深红色或橙色。其变种的佛焰苞有不同的颜色,如镶嵌白绿色、五彩色、乳白色及有精巧红边等,极富变化[1]。红掌的果实是小浆果,果内有种子,粉红,2~4粒。红掌的种子成熟需6~7个月,易失去活力,不易保存,常用的分株繁殖方式难以扩大生产。因此,离体快繁成为红掌产业化生产的理想途径。红掌是天南星科植物中较为的观花观叶兼宜的观赏植物,市场开发前景。前人的研究成果表明,红掌组织培养中外植体诱导技术已经成熟,但存在再生系统建立缓慢和增殖率不高的问题[2,3]。本试验在前人研究的基础上,进一步研究红掌阿拉巴马丛生芽团块增殖和壮苗培育的问题,以期找出一条缩短红掌繁育周期的途径,促进红掌阿拉巴马的商品化生产。

  

  1、材料与方法

  

  1.1试验材料

  

  以红掌品种阿拉巴马的嫩叶为外植体,在清水中冲洗20min,擦干水后,在0.1%HgCl2中消毒15min,用无菌水冲洗3遍后,切割成1cm×1cm大小的叶片块,接种在诱导培养基中,经过40d的诱导,产生愈伤组织,愈伤组织在增殖过程中产生芽团块,以芽团块为本试验增殖的材料。

  

  1.2试验方法

  

  1.2.1丛生芽增殖。

  

  取阿拉巴马的丛生芽团块接种于培养基中,其中:6-BA设3个浓度梯度,分别为0.5、1.0、1.5mg/L;NAA设3个浓度梯度,分别为0.05、0.10、0.20mg/L;KT设3个浓度梯度,分别为0.2、0.4、0.8mg/L。共设6个处理,分别为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.8mg/L(A1)、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT0.4mg/L(A2)、MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L(A3)、MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.8mg/L(A4)、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT0.4mg/L(A5)、MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L(A6),各培养基中均添加7.6mg/L琼脂、25mg/L蔗糖。每瓶接种4块丛生芽团块,大小为0.4cm×0.4cm,每个处理接种5瓶,共3次重复。培养条件为温度25℃,光照强度1600lx,光照时间10h/d。

  

  1.2.2壮苗培养。

  

  取高约1.5cm的芽,接种在生根壮苗培养基中,6-BA浓度梯度分别为0、0.05、0.10mg/L,NAA浓度梯度分别为0.1、0.3、0.5mg/L,NH4NO3浓度梯度分别为1650、2475、3300mg/L。试验共设6个处理,分别为MS+6-BA0mg/L+NAA0.3mg/L+NH4NO33300mg/L(B1)、MS+6-BA0.05g/L+NAA0.5mg/L+NH4NO32475mg/L(B2)、MS+6-BA0.1g/L+NAA0.1mg/L+NH4NO31650mg/L(B3)、MS+6-BA0mg/L+NAA0.3mg/L+NH4NO33300mg/L(B4)、MS+6-BA0.05mg/L+NAA0.5mg/L+NH4NO32475mg/L(B5)、MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L+NH4NO31650mg/L(B6),各培养基中均添加7.6g/L琼脂、25g/L蔗糖。每瓶接种7个小芽,每个处理5瓶,共3次重复。培养条件为温度25℃,光照强度1600lx,光照时间10h/d。

  

  1.2.3组培苗瓶外生根。

  

  选取生长良好、带有3张叶片、高3cm的组培幼苗为材料,经1周的炼苗后,洗干净培养基后种植于不同的培养基中,并配合不同的促根处理,45d后统计苗的生根率及生根数。共设16个处理,分别为育苗泥炭土+IBA0.6mg/L、育苗泥炭土+IBA1.0mg/L、育苗泥炭土+NAA0.6mg/L、育苗泥炭土+NAA1.0mg/L、育苗泥炭土+珍珠岩+IBA0.6mg/L、育苗泥炭土+珍珠岩+IBA1.0mg/L、育苗泥炭土+珍珠岩+NAA0.6mg/L、育苗泥炭土+珍珠岩+NAA1.0mg/L、椰糠+育苗泥炭+IBA0.6mg/L、椰糠+育苗泥炭+IBA1.0mg/L、椰糠+育苗泥炭+NAA0.6mg/L、椰糠+育苗泥炭+NAA1.0mg/L、椰糠+珍珠岩+IBA0.6mg/L、椰糠+珍珠岩+IBA1.0mg/L、椰糠+珍珠岩+NAA0.6mg/L、椰糠+珍珠岩+NAA1.0mg/L。

  

  1.3数据统计

  

  1.3.1丛生芽增殖。

  

  每周观察1次,1个月后统计丛生芽团块增重,计算公式如下:

  

  丛生芽增重=接种1个月后的重量-接种前的重量

  

  1.3.2壮苗培养。

  

  每周观察1次,1个月后统计苗高、新增叶数、苗重,计算公式如下:

  

  苗高=接种1个月后的高度-接种时的高度;

  

  新增叶数=接种1个月后的叶数-接种时的叶数;

  

  苗重=接种1个月后的苗重-接种时的苗重。

  

  1.3.3红掌小苗瓶外生根。

  

  每个处理种植组培苗50株,设3次重复,定植后放于70%遮阳网下进行统一栽培管理。60d统计移栽成活率及根系生长情况[6]。

  

  2、结果与分析

  

  2.16-BA、NAA、KT对丛生芽团增殖的影响

  

  从表1可以看出,6-BA是影响丛生芽团增殖的主要因素,各水平间差异显著。随着6-BA浓度的升高,丛生芽的重量增加呈直线上升趋势,表明6-BA在丛生芽增殖中具有重要作用,其浓度为1.5mg/L,丛生芽增重量达到14.80g。NAA与丛生芽的增殖也成正相关关系。KT与丛生芽的增殖成负相关关系,随着KT含量的增加,丛生芽团的重量增加反而减少,这证明了KT不利于丛生芽的增殖。综上所述,有利于丛生芽增殖的培养基配方为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L+琼脂7.6g/L+蔗糖25g/L。

  

  2.2NAA、6-BA、NH4NO3对壮苗的影响

  

  结果表明,6-BA是影响小苗增高重要的因素,NAA是次要因素。当6-BA浓度是0.1mg/L时,芽高度增加明显,随着6-BA浓度的增加,苗增高量减少,故6-BA浓度为0.1mg/L,苗增高量达到1.63cm。NAA是影响叶片增加的重要因素,当NAA浓度为0.05mg/L时,新增叶片数达15.71片,但新生叶片偏小。NH4NO3的浓度是影响小苗重量增加的主要因素,当NH4NO3浓度为1650mg/L时,小苗重量增加,达到7.71g;随着NH4NO3用量的增加,小苗的增重减少。

  

  表1不同植物生长调节剂对丛生芽团增殖的影响

  

  2.3瓶外生根

  

  红掌组培快繁过程中,组培苗生根难,易产生愈伤组织,但是采用瓶外生根就可以很好地解决再产生愈伤组织的问题。育苗泥炭土种植的组培苗生根率优于其他基质。在种植基质中加入IBA和NAA,NAA的处理效果均不太理想,而IBA处理的组培苗生根率均明显高于NAA处理。综上所述,采用育苗泥炭土+IBA0.6mg/L生根率和成活率高。

  

  3、结论

  

  试验结果表明,在0.5~1.5mg/L的范围内,随着6-BA浓度的增加,红掌丛生芽增殖能力不断增加,当6-BA浓度增加至1.5mg/L时效果。在壮苗培养过程中,6-BA浓度与苗高增加量成负相关,其浓度为0.1mg/L;NAA浓度是影响叶片增加的重要因素,其浓度为0.05mg/L时新增叶片数达到15.71片,但新生叶片偏小;NH4NO3浓度是影响小苗重量增加的主要因素,但随着NH4NO3用量的增加,小苗的增重减少,NH4NO3浓度为1650mg/L时,苗重增值大。在瓶外生根试验中,使用育苗泥炭土+IBA0.6mg/L,组培苗成活率和生根率达到。


 
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