植物组织培养是一项技术性很强的工作。为保障植物组织培养工作的顺利进行,要求实验室具备基本的一套组培设备,要求工作人员能够熟练的掌握组培技术及操作各种仪器设备。一个组织培养实验室的面积大小和装备程度取决于两个因素:一是所要进行的实验的性质;二是所能得到的经费的多少。而这两种因素在一起便能决定于一套组培设备多少钱?
组培实验室的基本配置设备有哪些?
(一)常规设备
1、天平
组织培养实验室需要2-3台不同精度的天平。
感量0.001g的天平(分析天平)和感量0.0001g的天平(电子天平)用于称量微量元素和一些较高度的实验用品。
感量0.01g和0.1g的天平,用于大量元素母液配制和一些用量较大的药品的称量。
2、冰箱
各种维生素和激素类药品以及培养基母液均需低温报存,某些试验还需植物材料进行低温处理,一般普通冰箱即可。
3、酸度计
用于测定培养基及其它溶液的pH,一般要求可测定pH范围1-14之间,精度0.01即可。
4、离心机
用于细胞、原生质体等活细胞分离,亦用于培养细胞的细胞器、核酸以及蛋白质的分离提取。根据分离物质不同配置不同类型的离心机。
细胞、原生质体等活细胞的分离用低速离心机;核酸、蛋白质分离用高速冷冻离心机;规模化生产次生产物,还需选择大型离心分离系统。
5、加热器
用于培养基的配制。研究性实验室一般选用带磁力搅拌功能的加热器,规模化大型实验室用大功率加热和电动搅拌系统。
6、其它
纯水器、分装设备
(二)灭菌设备
维持相对得无菌环境是组织培养实验室的基本要求。
1、高压灭菌锅
用于培养基、玻璃器皿以及其它可高温灭菌用品的灭菌,根据规模大小有手提式、立式、卧式等不同规格。
2、干热消毒柜
用于金属工具如镊子、剪刀、解剖刀,以及玻璃器皿的灭菌。一般选用200℃左右的普通或远红外消毒柜。
3、过滤灭菌器
用于一些酶制剂、激素以及某些维生素等不能高压灭菌试剂的灭菌,主要有真空抽滤式和注射器式。4、紫外灯
方便经济的控制无菌环境的装置,缓冲间、接种室和培养室必备。
(三)无菌操作设备
1、接种箱
是使用较早的简单的无菌装置,主体为玻璃箱罩、入口有袖罩,内装紫外灯和日光灯,使用时对无菌室要求较高。
2、净化工作台
其操作台面是半开放区,具方便、操作舒适优点,通过过滤的空气连续不断吹出,大于0.03um直径的微生物很难在工作台的操作空间停留,保持了较好的无菌环境。由于过滤器吸附微生物,使用一段时间后过滤网易堵塞,因此应定期更换。
(四)培养设备
培养设备是指根据需要所选用的不同规格和控制精度的用于植物细胞、组织和器官培养的设施和设备。
1、培养架
目前所有植物组织培养实验室植株繁殖培养的通用设施。成本低、设计灵活、可充分利用培养空间,以操作方便、大限度利用培养空间为原则。一般有4-5层,层间间隔40-50cm,光照强度可根据培养植物特性来确定,一般每架上配备2-4盏日光灯。
2、培养箱
细胞培养、原生质体培养等要求培养的实验,可用光照培养箱、CO2培养箱、湿度控制培养箱等培养。
3、摇床
进行液体培养时,为改善通气状况,可用振荡培养箱或摇床。
4、生物反应器
进行植物细胞生产次生产物的实验室,还需生物反应器。
为此至少需要有两个隔开的房间:一间用于玻璃器皿的清洗和贮存,以及培养基的制备,第二间用于放置培养物。培养室内应放一张桌子,上置体视显微镜和所需的光源,以便对培养物进行镜检。取决于本单位的条件,超净工作台可置于培养室中,也可置于一个普通研究实验室内僻静的一角,当然好是置于一个专门设计的无菌操作室内。此外,还需要有一间温室,以供试管苗移栽之需,这一般可与其它实验室共用。